高中生物教材出現的顔色反應較多,知識比較零散,不利于記憶和掌握,下面試對相關知識進行整理。
1.菲林試劑檢測可溶性還原糖
原理:還原糖 菲林試劑→磚紅色沉澱
注意:菲林試劑的甲液和乙液要混合均勻後方可使用,而且是現用現配,條件是需要加熱。
應用:檢驗和檢測某糖是否還原糖;不同生物組織中含糖量高低的測定;在醫學上進行疾病的診斷,如糖尿病、腎炎。
2.蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ檢測脂肪
原理:蘇丹Ⅲ 脂肪→橘黃色;蘇丹Ⅳ 脂肪→紅色
注意:脂肪的鑒定需要用顯微鏡觀察。
應用:檢測食品中營養成分是否含有脂肪。
3.雙縮脲試劑檢測蛋白質
原理:蛋白質 雙縮脲試劑→紫色
注意:雙縮脲試劑在使用時,先加A液再加B液,反應條件不需要加熱。
應用:鑒定某些消化液中含有蛋白質;用于劣質奶粉的鑒定。
4.碘液檢測澱粉和觀察動植物細胞的基本結構的染色劑
原理:澱粉 碘液→藍色;碘液能使動植物細胞着色。
注意:這裡的碘是單質碘,而不是離子碘。
應用:檢測食品中營養成分是否含有澱粉;驗證光合作用産生澱粉;在觀察動植物細胞基本結構——細胞膜、細胞質、細胞核時用碘液做染色劑,使細胞核染上顔色便于觀察。
5.DNA的染色與鑒定
染色原理:DNA 甲基綠→綠色
應用:可以顯示DNA在細胞中的分布
鑒定原理:DNA 二苯胺→藍色
應用:用于DNA粗提實驗的鑒定試劑
6.吡羅紅使RNA呈現紅色
原理:RNA 吡羅紅→紅色
蟾蜍血塗片
應用:可以顯示RNA在細胞中的分布。
7. 台盼藍使死細胞染成藍色
原理:正常的活細胞,細胞膜結構完整具有選擇透過性能夠排斥台盼藍,使之不能夠進入胞内;死細胞或細胞膜不完整的細胞,胞膜的通透性增加,可被台盼藍染成藍色。
應用:區分活細胞和死細胞;檢測細胞膜的完整性。
8.線粒體的染色
原理:健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料,可以使活細胞中的線粒體呈現藍綠色,而細胞質接近無色。
應用:可以用高倍鏡觀察細胞中線粒體的存在。
9.酒精的檢測
原理:橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與酒精發生化學反應,變成灰綠色。
應用:探究酵母菌細胞呼吸的方式;制作果酒時檢驗是否産生了酒精;檢查司機是否酒後駕駛。
10.CO2的檢測
原理:CO2可以使澄清的石灰水變混濁,也可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠在變黃。
應用:根據石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍水溶液變黃的時間長短,可以檢測酵母菌培養液中CO2的産生情況。
11.染色體(或染色質)的染色
原理:染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液、醋酸洋紅溶液、改良苯酚品紅染液)染成深色。
應用:用高倍鏡觀察細胞的有絲分裂;觀察低溫誘導植物細胞染色體數目變化;植物花藥離體培養時,可以通過染色鏡檢來确定其中的花粉是否處于适宜離體培養的發育期。
12.吲哚酚試劑與維C溶液呈褪色反應
原理:吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚鈉,其水溶液為藍紫色,維C具有還原性,能将其褪色。
維生素C溶液在中性條件下可使吲哚酚試劑由藍色變成無色,在酸性條件下可使吲哚酚試劑由藍色變成粉紅色。也可以用氯化鐵溶液代替吲哚酚試劑,維生素C溶液可把黃色的氯化鐵溶液還原成無色的氯化亞鐵溶液。
應用:可用于檢測食品營養成分中是否含有維生素C。
13.亞硝酸鹽的檢測出現玫瑰紅
原理:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應後,與N-1-萘基乙胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料。
應用:将顯色反應後的樣品與已知濃度的标準液進行目測比較,可以大緻估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。
14.脲酶的檢測
原理:細菌合成的脲酶可以将尿分解成氨,氨會使培養基的堿性增強,使PH升高,從而使酚紅指示劑變紅。
應用:在以尿素為唯一氮源的培養基加入酚紅指示劑,培養某種細菌後,看指示劑變紅與否可以鑒定這種細菌能否分解尿素。
15.伊紅美藍檢測大腸杆菌
原理:在伊紅美藍培養基上,大腸杆菌的代謝産物(有機酸)與伊紅美藍結合使菌落呈深紫色。
應用:用濾膜法測定水中大腸杆菌的含量。
16.剛果紅檢測纖維素分解菌
原理:剛果紅是一種染料,它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色複合物,但并不和水解後的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應。當在含有纖維素的培養基中加入剛果紅時,剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色複合物。當纖維素被纖維素分解菌分解後,剛果紅-纖維素的複合物就無法形成,培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈。
應用:篩選纖維素分解菌。
17.植物花粉細胞核的染色
原理:在做月季的花藥離體培養實驗時,選擇合适的花粉發育時期也是提高誘導成功率的重要因素,一般在單核靠邊期花藥培養成功率最高。選擇花藥時,一般通過鏡檢來确定其中的花粉是否處于适宜的發育期。确定花粉發育時期的最常用的方法有醋酸洋紅法(花粉細胞核内有染色體,染色體主要由DNA和蛋白質組成,醋酸洋紅為堿性染色劑,染色體易被堿性染料染色。通過染色,可以确定細胞核為單核期,還是雙核期,還可以确定其花粉的發育是單核居中期還是單核靠邊期)。但是,某些植物的花粉細胞核不易着色,需采用焙花青-鉻礬法,這種方法能将花粉細胞核染成藍黑色。
應用:月季花藥離體培養時,通過染色鏡檢确定花粉是否處于适宜的發育期。
例題:1.下列關于“低溫誘導植物染色體數目的變化”實驗的說法不正确的是( )
A.實驗中用洋蔥鱗片葉做材料而不能用大腸杆菌等原核生物代替
B.染色常用的染液為0.01g/ml的龍膽紫溶液,也可用醋酸洋紅代替
C.最好選用分裂中期的圖像進行觀察,此時染色體形态最清晰
D.低溫處理與觀察不能同時進行
解析:選A。實驗中所用材料應為進行細胞分裂的材料,而洋蔥鱗片葉是高度分化的細胞,已不再分裂。龍膽紫和醋酸洋紅均為堿性染料,易使染色體着色。染色體在中期時形态最為清晰,易于觀察。本實驗以染色體數目的變化為指标,而不是以染色體行為作指标的,所以應先處理後觀察。
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