文/ 華中農業大學 陳昌福、武漢科研時代生物技術有限公司 周鑫軍

在水産養殖過程中，采用各種消毒劑實施所謂的“四消”（苗種、餌料、工具和食場消毒），已經是我國水産養殖業者對水産養殖動物疾病防控中采用的常規措施。

二氧化氯（分子式為ClO2）雖然作為“國标漁藥”已經被農業農村部移出了清單，但是，不少漁藥制售企業将其作為“非藥品”，迄今為止依然在水産養殖中被大量地使用着。

在水産養殖過程中使用的ClO2制劑大緻有3種劑型，即水劑、粉劑和片劑。利用ClO2水劑對養殖水體進行消毒時，隻需要在測量水體後根據養殖水體體積，直接潑灑ClO2水劑至養殖水體中達到一定藥物濃度即可；利用ClO2粉劑對養殖水體進行消毒時，就需要先用少量池水将ClO2粉劑稀釋、活化15分鐘 左右後，再将其潑灑在養殖水體中達到一定藥物濃度；而采用ClO2片劑時，養殖業者大多是根據産品說明書中規定的用藥劑量，采用直接将其ClO2片劑抛灑在養殖水體中的用藥方法。

為了探讨不同劑型的ClO2制劑的使用方法對養殖水體消毒效果的影響，本試驗利用檢測消毒後養殖池水中可培養細菌數量變化的方法，對ClO2制劑的使用方法與消毒效果的關系進行了初步評價。現将結果報告如下：

1.材料與方法

1.1池塘水體消毒試驗地點及條件

本試驗在武漢市新洲區汪集鎮魚苗孵化場的養殖池塘中進行。該養殖池塘7畝，水深2.5米左右。試驗過程中，于18:30測定1.0m水深處的水質指标為亞硝酸鹽低于0.05mg/L、氨态氮0.2mg/L、溶解氧6.5mg/L以上，pH 8.5。試驗期間水溫變化範圍26.0~27.0℃。

為了保證消毒劑的藥物濃度在養殖水體中的準确性，采用PVC闆制作了12個規格一緻的内口徑邊長60厘米的正方形、高度2.48米的圍隔（圖1）。

圖1.示邊長60厘米、高2.48米的正四方形的PVC闆圍隔

圍隔在使用前，将其放置在養殖池塘中浸泡了4天。正式試驗時，将圍隔以站立的形式放置在養殖池塘中（圖2）。精确測定圍隔中的池水體積後，根據圍隔内水體的體積計算出用藥量，定量使用幾種消毒劑。

圖2.設置在養殖池塘中的PVC闆圍隔

1.2供試藥物及其用藥劑量

用于本試驗的2種來自不同公司生産的ClO2片劑，以編号Ⅰ、Ⅱ号片劑表示，另外2種ClO2粉劑，以編号Ⅰ、Ⅱ粉劑表示，共4種供試消毒劑藥物。

對ClO2片劑和ClO2粉劑，臨用前打開包裝袋，根據圍隔内水體的體積計算用藥量。将編号為Ⅰ、Ⅱ号的2種ClO2片劑，分别将每種片劑直接抛灑在2個圍隔内，而将在Ⅱ号ClO2片劑粉碎後，溶解在水中并活化15分鐘後，潑灑在2個圍隔中。将編号為Ⅰ和Ⅱ号ClO2粉劑用池塘水将藥物稀釋、活化15分鐘後，潑灑在圍隔内水體中，使不同圍隔内水體中的ClO2片劑或者粉劑的濃度，均分别達到0.90mg/L的濃度。

1.3消毒效果的監測

在圍隔中用藥結束後，分别在經過1.5小時和3小時後，在圍隔内利用采水器分别在離水面0.3米、1.0米和2.0米處采集水樣（圖3），同時在圍隔外的池塘中同樣水層采集水樣，作為為用消毒劑的對照組。

圖3.用采水器在消毒後的圍隔水體中采集水樣

将采集的水樣盛裝在經過高壓滅菌處理的玻璃試管内，并置放與帶有冰塊的采樣箱内帶回實驗室，在30分鐘時間内完成從采水樣到在培養基上接種細菌的過程。

采集的水樣帶回實驗室後，在無菌條件下從每個水樣中吸取500.0μL，在滅菌後的試管中用滅菌生理鹽水進行10倍、100倍、1000倍和10000倍的系列稀釋。分别從稀釋後的水樣中吸取50.0μL池塘水，接種在盛有BHIA培養基的培養皿中，每個稀釋度的水樣接種3個培養皿。接菌後的培養皿放在28℃的恒溫培養箱中，培養24小時後，通過計數培養皿中出現的菌落數，評價各種消毒劑在池塘水體中的殺菌效果（圖4）。

圖4.通過細菌培養法判斷不同ClO2制劑在池塘水體中的消毒效果

2.結果

2.1用藥1.5小時後水體中細菌數量的變化

在圍隔中投放ClO2制劑消毒劑結束後的1.5小時，分别從用藥濃度為0.9mg/L的ClO2粉劑組、ClO2片劑組和對照組各圍隔水體中，用采水器采集池水，帶回實驗室對養殖水體中細菌進行細菌培養養的結果如圖1所示。由圖1可以看出，當ClO2制劑的用藥濃度為0.9mg/L的條件下，稀釋并活化15分鐘後潑灑在圍隔中的ClO2粉劑，在潑灑用藥1.5小時後，顯示出了對圍隔水體中細菌良好的殺菌效果；而直接抛灑在圍隔水體中的ClO2片劑，與未用藥物的對照組相比，未顯示出明顯的殺菌效果。

圖1.對不同ClO2制劑消毒1.5小時後養殖水體中細菌的培養結果

注：“A”代表未用消毒劑的對照組；“B”代表片劑用藥組；“C”代表ClO2粉劑用藥組；“Ⅰ”代表各組的第1個圍隔，“Ⅱ”代表各組的第2個圍隔；“Q”代表将水樣經過了1000倍的稀釋；“W”代表将水樣經過了10000倍的稀釋；“a”代表30厘米水深處采取的水樣，“b”代表100厘米水深處采取的水樣，“c”代表200厘米水深處采取的水樣。

2.2用藥3小時後水體中細菌數量的變化

在圍隔中投放幾種ClO2制劑結束3小時後，分别從各圍隔水體中，用采水器采集池水，帶回實驗室對水體中細菌進行細菌培養的結果如圖2所示。由圖2可以看出，當ClO2制劑的用藥濃度均為0.9mg/L的條件下，将ClO2粉劑稀釋并活化15分鐘後潑灑在圍隔中的2個試驗組，以及将ClO2片劑粉碎後稀釋并活化15分鐘後潑灑在圍隔中的1個試驗組，在潑灑用藥3小時後，均顯示出了對圍隔内水體中細菌的良好的殺菌效果；而将ClO2片劑直接抛灑在圍隔水體中的試驗組，與對照組相比，則未顯示出明顯的殺菌效果。

圖2.對不同ClO2制劑消毒3小時後養殖水體中細菌的培養結果

注：“A”代表未用消毒劑的對照組；“B”代表ClO2的Ⅰ号片劑直接抛灑用藥組；“C”代表将ClO2的Ⅱ号片劑經粉碎稀釋在水體中并活化15分鐘後潑灑用藥組；“D”代表ClO2的Ⅰ号粉劑稀釋在水體中并活化15分鐘後潑灑用藥組；“E”代表ClO2的Ⅱ号粉劑稀釋在水體中并活化15分鐘後潑灑用藥組；“W”代表将水樣經過了10000倍的稀釋；“a”代表在30厘米水深處采取的水樣，“b”代表100厘米水深處采取的水樣，“c”代表200厘米水深處采取的水樣。

3.讨論

在2004年11月左右，農業農村部啟動了所謂“獸藥地方标準升國家标準”的工作，随後農業農村部受理了一些漁藥企業提交的将ClO2制劑作為水産用獸藥地标升國标的申請，并且順利地通過了由中國獸醫藥品監察所組織的相關專家評審，其評審結果發布在《獸藥地方标準升國家标準目錄（7）》中。随着這個結果的發布，也就是意味着ClO2制劑已經被農業農村部認定為我國水産用“國标漁藥”了。

然而，由于當時用于控制ClO2制劑質量的“國家（試行）标準”，并不能做到真正有效地控制ClO2制劑的産品質量，部分心術不正的人因此而制售了大量假冒僞劣的ClO2制劑。結果導緻在我國漁藥市場上流通的ClO2制劑陷入了泥沙俱下、魚目混珠、極為混亂的局面！

正是由于ClO2制劑的産品“質量标準”不能控制産品的質量，在2012年4月17日農業農村部發布的1759号公告，也就是在公布第三批地标升國标《獸藥試行标準轉正标準目錄（3）》中，ClO2制劑作為水産用“國标漁藥”的“國家（試行）标準”被從目錄中清除了。在該公告中，農業農村部對清除這個“國家（試行）标準”的原因說明是，“不同企業該類産品的處方和劑型、活化所需酸的比例、反應時間等均不一緻，試行質量标準中一步碘量法無法控制産品中二氧化氯的含量”。也就是從2012年後，部分漁藥制售企業開始将ClO2制劑作為水産用“調水改水”的“非藥品”進行推廣了。在ClO2制劑的劑型方面，除了原來的水劑和粉劑之外，還推出了因為便于使用而深受廣大水産養殖業者歡迎的ClO2的片劑。

無論是将ClO2制劑作為消毒劑使用的水産用“國标漁藥”，還是将其作為“改水調水”的“非藥品”使用，其目的無一例外都是為了殺滅水體中的微生物。

水産養殖業者将ClO2片劑直接抛灑在水産養殖水體中，雖然具有使用簡便而且使用者不會受到氯氣味的刺激等優點。但是，将其ClO2片劑直接抛灑在養殖水體中，是否具有與将ClO2粉劑用水稀釋并活化後潑灑在水體中的方法一樣的消毒效果？一直沒有見到相關的試驗報告。本試驗的結果證明了将ClO2片劑直接抛灑在養殖水體中的使用方法，沒有出現産品使用者期待的殺菌消毒效果。這也是我們要告誡廣大的水産養殖業者需要充分注意的。

最後，還需要說明的一個問題是，因為我們在使用這幾種ClO2制劑，尚沒有對其性狀進行檢測，因此還難以判定這些供試産品的質量優劣。不過，無論這些号稱ClO2片劑的質量究竟如何，将其直接抛灑在養殖水體中，是不會獲得理想的消毒殺菌效果的。

【關鍵字】：二氧化氯消毒非藥品水産養殖