王義之行書代表作品，首推《蘭亭集序》，又稱《蘭亭序》。《蘭亭集序》真迹已經失傳，現在能見到的是唐人墓本，主要有三種是虞世南臨本;二是褚遂良臨本;三是馮承素墓本，即響拓本，钤有唐中宗“神龍”小印，所以又稱“神龍本”，此本最接近原作，現藏北京故宮博物院。

《蘭亭集序》全篇共28行，324字。作者信手寫來，從容不迫。其用筆以藏鋒為主，露鋒為輔，顯得既内斂其氣，又外耀其神。結體疏密相間，斜正互依，大小參差，極盡變化之妙。全篇20個“之”字，7個“不”字，寫得各具姿态，無一雷同。其章法上下呼應，左右映帶和諧自然，不加雕飾。雖偶有塗改，卻又能一氣貫注。氣韻生動，格調平和，字裡行間無不淚淚流淌着王羲之心手雙暢的特定情感，無不表現出魏晉人那種超塵脫俗的靈秀風采。

宗白華《論〈世說新語》和晉人的美》一文說:“晉人風神潇酒，不滞于物，這優美的自由的心靈找到一種最适宜于表現他自己的藝術，這就是書法中的行草。行草藝術純系一片神機，無法而有法，全在于下筆時點畫自如，一點一拂皆有情趣，從頭至尾，一氣呵成，如天馬行空，遊行自在。又如庖丁之中肯，神行于虛。這種超妙的藝術，隻有晉人蕭散超脫的心靈，才能心手相應，登峰造極。”《蘭亭集序》充分表現了晉人“優美的自由的心靈”，具有超妙的藝術魅力，不愧為美的典範。

《蘭亭集序》寫好後，王義之十分得意，據傳以後他又寫了十餘遍，但都不及原作，因為藝術精品是不能重複也無法重複的。

晉穆帝永和九年(353)上已日(三月三日)，擔任右軍将軍、會稽内史的王義之與同道、好友及愛子在會稽山陰(今浙江紹興)的蘭亭舉行“修禊”之禮。所謂“修禊”就是臨水而祭，以祓除不祥。這一次共42人、有謝安、謝萬、孫綽、孫統、徐澧之、華茂、庾蘊、桓偉、都縣和義之愛子凝之、微之、ポ之、獻之等。俊度之多，規模之盛，前所未有。時當暮春，天朗氣清，風和日麗，綠樹蔥茏，山花競放。風度翩翩的江左名士們在這裡“一觞一詠”，“暢叙幽情”。“書聖”王義之更是優遊自适，心手雙暢，即興揮毫，用蠶繭紙、鼠須筆，寫下了這“天下第一行書”《蘭亭集序》。

《蘭亭集序》是一篇優美的寫景抒情散文，其主要特點是:辭采清亮，文思幽遠。文章從開頭到“信可樂也是前半部分，叙述宴集的時間、地點、緣由、人物，描繪環境、天氣，抒發遊賞景物的愉快感受。着色輕濙，用詞淺切，語氣舒展。文中對景物的描繪和觀賞的感受，值得玩味。天朗氣清，惠風和暢。高山流水，林木搖曳。曲水流觞，遊目騁懷。置身于其間，文士們似乎忘掉了自我，與物同化，生命意識滲透在深邃的宇宙精神之中。此時此地，煩惱頓消，心境澄澈，“信可樂也”。文章自“夫人之相與以下，情調發生轉折。作者從自然中得到愉悅，又從中感受到悲哀。這是因為:大自然是自在自足無須外求的，人生卻需要外在的事物來滿足;自然是永恒的，人生卻如此短暫。随着時光的流逝，那些令人欣喜的事物，很快就成了陳迹，隻留下無窮感慨而已。何況人的生命“修短随化終期于盡”，這種痛苦更是難以擺脫。最後，作者又把這種痛苦推延到整個人類:昔人興感，已契我心，後之視今猶今之視昔，表現了對生命的深沉謄戀與執着。作者面對美麗的山水，體會整個宇宙和人生，感受最大的快樂與最大的悲哀，充分顯示了晉人的深情與超邁。