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如何構建一個基因的過表達載體

更新时间：2024-11-11 22:30:46

　　1、首先要用一定的限制酶切割質粒，使質粒出現一個缺口，露出黏性末端。

　　2、用同一種限制酶切斷目的基因，使其産生相同的黏性末端。

　　3、将切下的目的基因的片段插入質粒的切口處，首先堿基互補配對結合，兩個黏性末端吻合在一起，堿基之間形成氫鍵。

　　4、再加入适量DNA連接酶，催化兩條DNA鍊之間形成磷酸二酯鍵，從而将相鄰的脫氧核糖核酸連接起來，形成一個重組DNA分子。如人的胰島素基因就是通過這種方法與大腸杆菌中的質粒DNA分子結合，形成重組DNA分子。

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