常規精液檢查的缺點是每次受檢的精子數目很有限,對精子運動功能的判斷帶有主觀因素,所以人們一直謀求尋找測定精子運動的簡便而客觀的方法。下面簡介若幹新技術:
◆一、定時曝光技術◆
采用暗視野顯微鏡對運動中的精子進行定時曝光拍照,精子就在1秒鐘的過程中留下了運動的軌迹,根據不同精子留下的軌迹長度,可以求出它們運動速度的快慢。缺點是曝光時間太長,軌迹粗重,重疊後不易辯認。但單純縮短曝光時間,精子運動的軌迹又太短,難于比較運動的差異。
◆二、多次曝光技術◆
在光源與視野之間加一個黑盤,上面有6條狹縫透光,在仍舊曝光1秒鐘時,電動機帶動黑盤轉一圈,這時精子的運動軌迹就成了6個連成串的亮圓卷,克服了上述缺點。有一些臨床和研究單位仍采用這一技術。
◆三、高速顯微電影攝像技術◆
一般是對單個精子攝影,追蹤2秒。可以得到較準的數據,但設備複雜,成本昂貴,使用不便。然而,它證實了這樣一種觀點,形态正常的精子運動速度比不正常者要快,而兩種精子尾部的擺動則沒有區别。這說明精子頭形态異常引起的流體動力學改變,是導緻妊娠率下降的原因。
◆四、激光光散射測量法◆
國外已研究多年,利用氦一氖激光發生器發射的激光束,通過濾光片衰減成低能量,活動精子經過光束時發生光散射,根據光學多普勒效應,由精子活動速度決定的大緻向前的散射光強度以不同頻率傳播,從而得出相應的光譜。通過在偏離激光束11°角的針孔透鏡收集光波并進行頻譜分析,這樣就可以對精子運動速度進行實時、在線的現場評價。從統計學意義上看,激光法比上述各法都更為優越,因為激光測量所得的運動指數,包括具有統計學意義的精子速度分布函數,它可以同時測定數百個精子,完全排除主觀因素,對精子無傷害,敏感度高,足以确定化合物劑量反應關系和進行不同藥物、不同濃度的藥理作用比較研究。但國外采用的散射光收集法隻能測定總的運動速度,不能對前向運動作單獨的測定,而前向運動速度在判斷精子是否正常,是否具有生育力上更有參考價值。
國内清華大學水利工程系和生物系已從事激光精子運動速度測定工作多年。自1987年起又與國家計劃生育委員會科學技術研究所合作,經過4年努力,完成了國産準彈性激光光散射測量儀的研制及臨床應用研究,在1990年在北京及全國發明展覽會上均榮獲金牌獎,從而把國内精子功能測定水平提高了一大步。該儀器與美國及德國所采用的參考光束有所不同,大膽應用了偏振差動式雙光束型的系統,這在世界上也屬首創。它的特點是結構緊湊、調試方便、使用簡單、信噪比高、不易失調及穩定可靠等。經過1000多例臨床研究證實,正常人精子運動速度平均為35微米/秒,大多數不育病人的精子運動速度偏低,平均為31微米/秒,低于28微米/秒者可認為精子活力不正常。
◆五、精子功能圖象自動分析儀◆
電子技術的發展為生物醫學的顯微觀測技術開辟了新的前景。近年來顯微電視錄象系統的功能不斷加強,自動化程度和分辨力不斷提高,特别是與電子計算機組裝為一體,經圖象處理闆的處理,能迅速地進行實時、在線的現場動态圖象的計算,從而為臨床和科研提供了一種客觀、定量、準确的測試手段。它能将每個精子運動的軌迹轉化為瞬時速度及角速度,較長時間的記錄,還能測知每個精子的活動耐力,并通過多元方差分析獲知精子活動的模式、活力和耐力的綜合情況。但它的缺點是設備過于昂貴,無法普及。